PRACTICA 4: TP 

OBJETIVO:

Que el alumno conozca la similitud del TP y el TPT que son casi igual pero que ambas detectan cosas diferentes al paciente que se realizan con diferentes fines de determinación.

INTRODUCCIÓN:

El fibrinogeno es la proteina precursora de la fibrina que al entrecruzarse se convierte en el componente principal del coagulo de la fibrina. La trombina rompe el fibrinogeno para formar un fenómeno de fibrina . los monomeros de fibrina se unen para formar los polímeros insolubles de la fibrina. Puede haber una deficiencia de fibrinogeno en condiciones tale como afrinogenemia congenita ,hipofigrinemia y en algunos casos de disfrinogenemia.

MATERIAL:

Baño maría

Tubos de ensayo

Pipetas automatizadas

Centrifuga

Puntillas para pipetas

 

PROCEDIMIENTO:

1. Recosntituya el reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) y mantengalo a temperatura ambiente (18 -26°C9 durante la prueba.
2. Añada 0.2 ml(200ul ) de la muestra de plasma diluida a una copita de Fibrinometro.
3. Incube durante 1-3 minutos  a 37°C(no mas de 5 minutos )
4. Después de la incubación, coloque rápidamente 0.1 ml (100ul) del reactivo TrinCLOT Fibrinogeno (reactivo de trombina) en la copita de fibrinometro y simultáneamente active el cronometro.
5. Anote los resultados  del tiempo de coagulación en segundos.

RESULTADOS DE LA PRUEBA:

En esta prueba se llego al resultado de que la muestra se coagulo en un tiempo de:

1:10(un minuto y siete segundos)

PRACTICA 3:  TPT

OBJETIVO:

Que el alumno conozca y lleve a la practica los cocimiento ya adquiridos anteriormente mediante investigaciones,  y que el alumno conozca para que se realiza esta prueba y que significan los resultados de la prueba de laboratorio.

INTRODUCCIÓN:

La prueba de Tiempo de Tromboplastina Parcial es un procedimiento de screening universalmente aceptado que se utiliza para detectar anomalías en el sistema intrinseco de coagulación. Puede utilizarse también en pruebas de factores para detectar deficiencias de os factores ll, V, Vll, lX, X, Xl y Xll, pero es insensible al factor plaquetario.

El reactivo de TriniCLOT aPTT S se mezcla con plasma del paciente para proporcionar una cativacion uniforme optima de lamuestra.

MATERIAL:

Baño maria

Tubos de ensayo

Pipetas automatisadas

Centrifuga

Puntillas para pipetas

 

PROCEDIMIENTO:

1. Calentar previamente a 37°C un volumen suficiente de reactivo TrinCLOT aPTT S y CaCl2 TrinCLOT a PTT S.
   
   
2. etiquetar un tubo de ensayo para cada muestra (paciente y control) a analizar.
3. Pipetear 0.1ml de muestra o control al tubo adecuado; a continuacion, pipetear 0.1 ml de reactivo TrinCLOT aPTT S a cada tubo.
   
   
4. despues de la activación , pipetear inmediatamente a cada tubo 0.1 ml de CaCl TrinCLOT aPTT S previamente calentando,einiciar simultáneamente el cronometraje para la deteccion sde la coagulacion mediante un método de deteccion conveniente.Anotar el tiempo en segundos transcurridos hasta que se detecte la coagulación.

RESULTADO:

En la muestra que se estudio se llego a la conclusion de que la muestra se coagulo en un tiempo de:

1:30 (un minuto y veintiocho segundos).

PRACTICA 2: "PRUEBA LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO Y RH DE LA FORMA DIRECTA"

OBJETIVO: 

Al finalizar la practica el alumno podrá dominar la técnica para la realización de la prueba para determinar el grupo sanguíneo y Rh, empleando la técnica directa (con sangre total) utilizando los antisueros correspondientes para su determinación en el sistema ABO.

INTRODUCCIÓN:

PRINCIPIO

en la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos llamado antígenos que representan los llamados grupos o  factores sanguíneos.

se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H(humana).

Los primeros grupos sanguíneos que se descubrieron fueron los llamados ABO y actualmente se conocen muchos mas.

MATERIAL                                                                                        SUSTANCIAS:

Pipetas pasteur                                                                           Suero Anti-a

6 tubos de ensayo                                                                       Suero Anti-B 

Gradilla                                                                                       Suero Anti-D

                                                                                                   Solución isotonica de NaCL al 0.9%

EQUIPO

Centrifuga

PROCEDIMIENTO:

Método de tubo de ensaye:

1.- previa asepsia, practicar venopunción  y recoger 1ml de sangre

2.- depositar en un tubo de ensaye, 19 gotas de solución salina y una gota de eritrocitos para formar la suspencion de eritrocitos al 5%.

3.- Marcar tres tubos de ensaye con las letras A, B Rh respectivamente depositar en el tubo "A" dos gotas de suero Anti-"A" , en el tubo "B" dos gotas de Anti-b y en el tubo Rh dos gotas de suero Anti-D.

4.-Añadir a cada tubo una gota de suspencion de eritrocitos al 5%( preparada con anterioridad)

5..- Centrifugar a 1000 r.p.m durante dos minutos

6.- Sacar los tubos y observar inmediatamente la presencia de aglutinación 

RESULTADO:

METODOS DE TUBO DE ENSAYE

1. Si existe aglutinación en el tubo "A" la sangre es de tipo "A".
2. Si existe aglutinación en el tubo "B" la sangre es de tipo "B".
3. Si existe aglutinación en el tubo "A" y "B" la sangre es de tipo "AB".
4. Si no existe aglutinación en los tubos "A" y "B" la sangre es de tipo "O".
5. Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh positivo.
6. Si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera de factor Rh negativo.

RESULTADO DE LA PRUEBA:

En esta prueba se llego a la conclusión de que el resultado de la prueba era "B" con Rh positivo, ya que existió aglutinación en el tubo "B" y también en el tubo Rh.

PRACTICA 1:

"PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA"

OBJETIVO:

Al termino de la practica el alumno estará capacitado para comprobar indudablemente la tipificación sanguínea.

INTRODUCCIÓN:

El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac, que se manifiesta microscopicamente mediante una aglutinación.

MATERIAL                                                                                                  SUSTANCIAS

Pipetas pasteur                                                                              Eritrocitos lavados A y B conocidos

4 tubos de ensayo                                                                          Suero del paciente

Gradilla

Centrifuga

PROCEDIMIENTO

1.- Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3400 r.p.m durante 3 minutos y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.

2.- A cada uno de los tubos se añade 1cm de solución salina y se suspenden los globulos rojos.

3.- Se marcan 2 tubos de ensaye, con  la letra A y el segundo con la letra B,añadiendo dos gotas de suero.

4.- Añadir a cada tubo una gota de suspención de eritrocitos al 2% (prepara con anterioridad) previamente mezclada, al tubo A suspención "A" y al tubo  B suspención "B".

5.- Centrifugar a 1000r.p.m durante 2 minutos.

6.- Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.

RESULTADO:

Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene anticuerpos B,  el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a una sangre del grupo B.

Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene anticuerpos B, el suero que tiene Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a una sangre del grupo A.

Si el suero problema aglutina los glóbulos rojos A y B significa que tiene anticuerpos A y B el suero que tiene anticuerpos Ay B corresponden a la sangre o, en consecuencia el suero problema corresponde a una sangre a una sangre del grupo O.

Si el suero problema no aglutina en los glóbulos rojos A y B significa que no tiene anticuerpos ni A ni B, por lo tanto el suero problema pertenece a una sangre del grupo AB.

 

RESULTADOS DE LA PRUEBA.

En la realización de muestra prueba de laboratorio se llego a la conclusión de que se da el primer caso que ya anteriormente se habían halado tomando en cuenta la aglutinación que se presento en los glóbulos rojos A que esto significa que tiene anticuerpos B y que el suero tiene ag A correspondientes a la sangre B.

"Bio-HBsAG"

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba "Bio-HBsAG"en tira esta diseñada para la detección rápida cualitativa del Antígeno de Superficie  Hepatitis B en Suero Humano.

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA 

La hepatitis B es una de las mayores causas de hepatitis en la poblacion mundial. Las personas que son portadoras del virus pueden ser fuentes de infección.

Esta prueba esta elaborada a partir de tecnología de inmunoensayo cromatografico de flujo lateral conteniendo una membrana filtrante pre-impreganada con anticuerpos "Anti-HBsAG" y reactivos de oro coloidal activados con anticuerpos "Anti-HBsAG". En la prueba de tira existen dos regiones a lo largo de la membrana , la zona en donde se obtiene el Resultado, denominada región Test "T" y la región de Control "C" , donde se verifica que el desarrollo de la prueba haya sido satisfactorio.

En la región test "T" aparecerá una linea de color rojiza como resultado de la presencia de  Bio-HBsAg en la muestra evaluada . En caso contrario no aparecerá ninguna linea en dicha región . En la región de Control "C" siempre aparecerá una linea de color rojiza independientemente de una resultados positivo o negativo, como indicador interno de control de calidad de la prueba para verificar que esta se realizo adecuadamente.

MATERIAL

-Equipo de "Bio-HBsAG"

-Pipetas desechables

PRECAUCIONES 

1. Este equipo es para uso de diagnostico in-vitro.

2. Este equipo es exclusivamente para uso profesional 

3. No pipete el material con la boca. No fume coma o beba en áreas donde se encuentre el producto.

4. las personas que llevan acabo la prueba deberán utilizar bata y guantes desechables al momento de tomar la muestra y llevar acabo la prueba lavando muy bien sus mano después de realizada la prueba 

5. Utilice una punta de pipeta desechable para cada prueba 

6. Todos lo derramen de líquidos deberan ser limpiados con hipoclorito de sodio o equivalente 

7. Maneja la muestra y el material baja procedimiento rutinarios de tratamiento de agentes infecciosos.

8. Evite contacto directo de manos con ojos y nariz durante la recolección de muestra y desarrollo de la prueba.

DESARROLLO DE LA PRUEBA

1. Saque la tire del sobre y coloquela en una área de trabajo adecuada

2. Codifique la tire utilizada para que coincida con los datos de la muestra del paciente 

3. Coloque suficiente suero en el micro contenedor, recomendando la utilización de un recipiente plástico desechable de 10 mm

4. Tome la tira e introduzca el extremo que tendra contacto con el suero, teniendo precaución de que no se sumerja mas aya de la linea delimitada por las flechas

5. Resultados altamente positivos aparecerá apartir del segundo o tercer minuto. Muestras positivas conteniendo una menos concentración de postividad podrán tardar hasta 15 minutos en aparecer. No interprete resultados después de transcurrido 30 minutos.

Limpie profundamente el área de trabajo después de haber echo las pruebas con hipoclorito de sodio o equivalente.

RESULTADO:

 NO PRESENTO ANTÍGENOS DE SUPERFICIE DE HEPATITIS "B"