Grupo Sanguineo placa y tubo

GRUPO SANGUINEO Y Rh

DETERMINACIÓN DE AGLUTINOGENOS (TIPADO GLOBULAR)

Principio: En la membrana del glóbulos rojo existen complejos químicos llamados antígenos que representan los llamados  grupos o factores sanguíneos .

se sabe que estos complejos químicos se han generado de una sustancia llamada precursora, llamada sustancia H (humana). Sobre esta sustancia se adhieren carbohidratos en un orden determinado. Para la sangre de tipo de cero "O" se unen dos moléculas de glactosa, una de mucosa  y una de glucosamina.

sobre esta cadena puede adherirse una nueva molécula y se cambia el tipo, si es de glucosamina se tiene le grupo "A" y si es de glactosa se tiene el grupo "B". Si se unen ambas moléculas en diversa posición se tiene el grupo AB:

Los primero grupos sanguineos que se descubrieron  fueron los llamdos ABO, y actualmente se conocen muchos mas.

El sistema Rh es independiente del sistema ABO, pero igual de importante en la tipificación sanguinea.

hay antigenops presentes en los eritrocitos de casi todas las persona y se les llama Universales, otros antígenos se han concentrado en una sola familoia y se les llama personales.

la importancia de la determinación de los grupos sanguineos y rh en el laboratorio es en las transfisiones sanguineas y en la eritroblastosis fetal.

FACTOR Rh

OBJETIVO: El alumno determinara el grupo sanguineo y el factor Rh de una mestra sanguinea, utilizando los antisueros correspondientes y previa demostracion correctamente.

INTRODUCCIÓN: Los grupos sanguineos se han clasificado asi por poseer caracteristicas diferentes, estas caracteristicas son los antigenos (Aglutinogenos) y los anticuerpos (Aglutininas ) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las tranfusiones.

 

MATERIAL                                                                                            REACTIVOS

1 EQUIPO DE EXTRACCION SANGUINEA                                SUERO ANTI A

1 PLACA DE VIDRIO EXCAVADA                                               SUERO ANTI B

10 APLICADORES DE MADERA (PALILLOS)                             SUERO ANTI D

LANCETA ESTERIL                                                                        SOL. ISOTONICA

4 TUBOS DE ENSAYE 10 x 100                                                      DE NaCL AL 0.9%

GRADILLA

CENTRIFUGA

MÉTODO PARA PORTAOBJETOS O PLACA:

TÉCNICA: Se utiliza la punción cutánea por medio de la lanceta, se desecha la primera gota y se deposita 1 gota en cada una de la excavaciones de la placa en forma horizontal o marcar con letras A, B, y Rh, posteriormente se añade una gota de suero Anti A, Anti B, Anti D respectivamente.

 

Mezclar perfectamente con un hisopo (aplicador) cada preparacion (No contaminar las diferentes preparaciones).

Agitar suavemente la placa con movimientos circulares durante 30 segundos aproximadamente.

Leer el resultado (una aglutinación macroscopica indicara la reacción).

Anti A                     Anti B                                Anti D                El grupo sanguíneo y su factor sera:

  +                               -                                         +                          A Rh Positivo

  +                               -                                         -                           A Rh Negativo 

  -                                +                                        +                          B Rh Positivo

  -                               +                                         -                           B Rh Negativo

  +                              +                                         +                          AB Rh Positivo

  +                              +                                         -                           AB Rh Negativo

  -                               -                                         +                           O Rh Positivo

  -                               -                                         -                            O Rh Negativo

En donde (+) Existencia de aglutinación 

                (-) Ausencia de aglutinación

 

 

MÉTODO EN TUBO DE ENSAYE

TÉCNICA: Previa asepsia practicar venopuncion y recoger 1ml de sangre 

Depositar en un tubo de ensaye , 2ml  de sangre y 9.8ml de sol isotónica de NaCl al 0.9% par formar una suspención de eritrocitos al 2%.

Marcar 3 tubos de ensaye con las letras A, B, Rh respectivamente depositar en el tubo "A" una gota de suero Anti-A en el tubo B una gota de suero Anti-B y en el tubo Rh una gota de suero Anti-D.

Añadir a cada tubo una gota de suspención de eritrocitos al 2% (preparadas con anterioridad)

Centrifugar a 1000 r.p.m durante un minuto.

Sacar los tubos e inmediatamente observar si existe aglutinación.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Si existe aglutinación en el tubo "A" la sangre es del tipo "A"

Si existe aglutinación en el tubo "B" la sangre es del tipo "B"

Si existe aglutinación en los tubos A y B la sangre el del tipo "AB"

Si no existe aglutinación en los tubos A y B la sangre es del tipo "O"

Si existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera factor Rh positivo

si no existe aglutinación en el tubo Rh la sangre sera factor Rh negativo

GRUPO 

SANGUÍNEO

ANTISUEROS

                   ANTI A                              ANTI B                              ANTI AB                      ANTI D

A            Aglutinación                          No  Aglutinación               Aglutinación               No  Aglutinación 

B           No Aglutinación                     Aglutinación                      Aglutinación               No  Aglutinación 

AB         Aglutinación                          Aglutinación                     Aglutinación               No   Aglutinación 

O            No  Aglutinación                   No  Aglutinación              No  Aglutinación        Aglutinación 

D            No Aglutinación                    No  Aglutinación              No  Aglutinación        Aglutinación 

Recuento de plaquetas

                                                                   Recuento de plaquetas 


Objetivo:

Que el alumno aprenda a contar correctamente las plaquetas.

Introducción:

Las plaquetas son los elementos formes mas pequeños de la sangre, actúan en la hemostasia y en el mantenimiento de la integridad vascular, ademas de participar en el proceso de la coagulación sanguínea.

Las plaquetas son difíciles de contar debido a que son pequeñas y deben distinguirse de los restos celulares. otra fuente de dificultad reside ne en su tendencia de adherirse al cristal , a cualquier cuerpo extraño y en particular unas de otras.
Para el conteo de plaquetas se utiliza oxalato de amonio como diluyente y se cuentan en los mismos cuadros para glóbulos rojos y el resultado se multiplica por 1000.

Material y Reactivos

1. Pipeta de thoma para globulos blancos
2. Microscopio
3. Caja de Petri con papael filtro
4. Camara de Neubauer 
5. Oxalato de amonio al 1%
6. Sangre venosa con EDTA

Procedimiento 

1. Mezclar la sangre perfectamente.
2. Aspirar la muestra hasta la marca 0.5
3. Limpiar con una gasa el exceso de sangre y aspirar oxalato de amonio hasta la marca 11.
4. Mezclar de 3 a 5 min. desechar las 3 primeras gotas y llenar las cuadriculas de la cámara de Neubauer.
5. Dejar sedimentar de 10 a 15 min. la cámara en una caja petri con un disco de papel filtro húmedo en el fondo para evitar la evaporación.
6. Enfocar la camara y contar las plaquetas en los mismos cuadros para globulos rojos empleando el objetivo 40 X.
7. La plaquetas contadas se multiplican por  1 000 para obtener el numero de plaquetas por mm.
8. Valor de referencia
   
   
   150 000  a 450 000 

TINCION DE WRIGHT  RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Introducción

El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido de sangre.
Al conocer la protección de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyetico podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Pare el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.
Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos pero el mas utilizado es el de almena y en linea.

Material y Reactivos

1.  Frotis sanguineo
2. Microscopio 
3. Aceite de inmersion 
4. Un contador de celulas

Procedimiento 

1. Se  coloca el frotis en el microscopio y  se enfoca.
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersion y se observa con el objetivo de de 100 X
3. Si el recuento se hace en  linea de empieza en el borde de un frotis hasta el otro borde en la linea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los monucleares ( monositos y linfocitos ) y los polimorfonucleares ( neutofilos, eosinofilos y baofilos ) segun su morfologia.
5. Se reportan en % ( Valor relativo) o en valor absoluto ( mm3)

Valores de referencia

                                                      Adultos                                                     Niños 

Linfocitos                                     20-55 %                                                    20 - 50 %                           Monocitos                                    2 - 6 %                                                        0 - 9 %

Eosinofilos                                   1 - 5 %                                                        0 - 8 %

Basofilos                                       0 - 1%                                                        0 - 1 %

Neutrofilos                                   45 - 70 %                                                   20 - 60 %

Bandas                                           0 - 5 %                                                       1 - 6 %